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M5 Magic Plus High-Fidelity DNA Polymerase ( with dNTPs)(“长又亮”plus超保真酶)
货号 规格 销售价
MF945-01 100U 798.00
MF945-05 5x100U 3368.00
  • M5 Magic Plus High-Fidelity DNA Polymerase ( with dNTPs)

    (“长又亮”plus超保真酶)使用说明书

     

    产品名称                              单位         货号

    M5 Magic Plus High-Fidelity DNA Polymerase ( with dNTPs)   100U        MF945-01

    M5 Magic Plus High-Fidelity DNA Polymerase ( with dNTPs)   5×100U      MF945-05

     

    储存条件

    长期保存,请置于-20˚C,有效期24个月。经常使用,可置于4˚C保存至少六个月。

     

    产品简介

    聚合美Magic plus超保真DNA聚合酶在Magic超保真酶系列技术基础上,应用了聚合美特制的<延伸增强剂>,抑制<PCR停滞现象>,不仅保持了Magic超保真酶的高保真性,更明显提高了对微量模板的扩增效率。Magic plus具有5’ 到3’ DNA 聚合酶活性和3’ 到5’ 的外切酶活性(即校读活性),能够纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配现象,在标准缓冲液中其保真度约相当于普通Taq DNA Polymerase的50倍、Pfu DNA Polymerase的6倍。同时该酶还具有快速的DNA合成速度,约相当于普通Taq DNA Polymerase的4-6倍、Pfu DNA Polymerase的8-12倍。该酶合成能力很强,即使是复杂的模板,也能快速准确的完成反应,尤其适用于对保真性要求高的DNA长片段的快速扩增,如基因克隆、测序、定点突变、SNP分析等,也可用于DNA片段的末端补平。使用聚合美Magic plus超保真DNA聚合酶扩增得到的PCR产物无3’ 端突出碱基,不可直接用于TA克隆,可以用聚合美特制的平末端TOPO克隆(货号MF021和MF022)。

     

    单位定义

    用大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74˚C、30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量。

     

    产品组份

    Magic plus High-Fidelity DNA Polymerase (1U/μl)    100 μl

    10×Magic plus PCR Buffer                         1.0 ml

    25mM MgSO4                              1.0 ml

    2mM dNTPs                               1.0 ml

     

    【质量控制】

    以λ DNA为模板,能有效扩增20 kb的DNA片段;以基因组DNA为模板,能有效扩增单拷贝基因;无内切酶和外切酶污染。

     

    适用范围

    高保真扩增,长片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变等;高GC含量、具有二级结构的复杂模板的扩增;微量模板的扩增。

     

    操作示例

    按下表配制PCR反应体系:

    10×Magic plus PCR Buffer                        

    2.5 μl

    25mM MgSO4

    2.5 µl

    2mM dNTPs

    2.5 µl

     Primer 1 (10 μM)                      

    0.5 µl

     Primer 2 (10 μM)                     

    0.5 µl

    Template DNA* 

    10-200ng

    Magic plus High-Fidelity DNA Polymerase

    0.5µl

     ddH2O补足至

    25 µl

     

    建议的PCR条件

     

    95°C

    2 min. 

    32-36 cycles of:

     

    95°C

    25 sec. 

    53–64°C

    20-25 sec. 

    68°C

    15-30sec./1kb

    68°C

    5 min. 

    保持 4°C forever

     

     

    <*模板量:10~200 ng 基因组 DNA,10~30 ng 质粒,或 1~2 μl RT-PCR 反应后的 cDNA。以上举例为常规 PCR 反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩小反应体系>。

     

    注意:设置退火温度时,Magic plus超保真酶为Tm+3,不是Taq酶的Tm-5!

     

     

    备注

    本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时,本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。