您好,欢迎来到聚合美!
010-59724293/13811994670
010-59724293
首页 > Direct PCR扩增试剂盒
M5 HiPer 植物组织直接PCR试剂盒
货号 规格 销售价
MF284-01 100T 698.00
MF284-05 500T 3298.00
  •  

     

     

    产品名称                      单位       货号

    M5 植物组织直接PCR试剂盒       100T    MF284-01

    M5 植物组织直接PCR试剂盒       500T    MF284-05

     

     

     

    储存条件

     

    2x DirectAmp PCR Mix -20℃ 保存,避免反复冻融次数过多,3周内短时间使用可放4℃保存。

    其余常温或者4℃保存,有效期12个月。

     

     

    产品简介

     

    本制品采用独特的裂解缓冲液快速裂解植物组织,释放的DNA无需纯化便可以作为模板,用高度耐抑制物的2x DirectAmp PCR Mix扩增,扩增产物可直接上样电泳。适用范围:简单非多糖、多酚植物。特点:简单,高通量筛选;一般扩增大小<2kb。

     

     

    产品组分

                            MF284-01      MF284-05

    Stock A                    0.5ml           2.5ml

    Stock B                     1ml             5ml

    Buffer N              5 ml       25 ml

    2x DirectAmp PCR Mix        1 ml      5 ml

    ddH2O (PCR grade)             10 ml               50ml

     

     

    使用方法

     

    1. 配制即用裂解液:按照5μl Stock A+ 10μl Stock B+ 85μl ddH2O = 100μl 比例配制成即用裂解液。每个样品需要50μl即用裂解液,具体量可以根据样品数量按照比例放大配制即可。

     

    1. 取50μl裂解液于0.2 mL PCR薄壁管中(没有PCR仪器者也可以用0.5ml离心管)。然后置测试材料叶片(一般20mm2左右,可剪成3/4条放入)与裂解液中(也可以用吸头戳几下帮助裂解),吹打或者涡旋混匀,确保叶片碎块浸没在裂解液内。

     

    1. 98℃裂解30min(建议PCR仪上操作),根据情况裂解时间可以在15分钟-1小时内调整。

     

    1. 取出离心管迅速放冰上,加入50μl Buffer N,混匀,即可直接用做PCR模板或置于4℃或-20℃保存。

     

    1. PCR扩增:

     

    建议PCR条件(以20 μl反应体系为例)

     

     

    Components

    Volume

    Final Concentration

    裂解混合物模板

    1 μl

    as required

    2x DirectAmp PCR Mix

    10 μl

    1 ×

    Forward Primer (10 μM)

    0.4 μl

    0.2 μM each

    Reverse Primer (10 μM)

    0.4 μl

    0.2 μM each

    ddH2O to final volume

    20 μl

    Not applicable

     

     

    PCR 循环

     

    95℃      5-10 min

    94℃      30 sec

    54-60℃   30 sec 35-40 cycles

    72℃      1 kb/min

    72℃      5-10 min

     

     

    注意事项

    1. 如果扩增条带较弱,可以适当增加减少模板加入量,裂解混合物模板一般可以在0.5μl-2μl内调节,但是注意一般不能超过4μl,加入太多,反而抑制PCR反应。
    2. 如果样品多酚多糖较多,扩增效果不理想,可在20 μl PCR反应体系加入2μl 10%PVP40改善效果。
    3. 如果非特异扩增较多,可调整退火温度,或者适当增减模板用量。
    4. 各溶液使用完毕后,应该立刻盖紧盖子,以免PH改变影响质量。

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

    备注

    本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时,本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。