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M5 HiPer Taq DNA Polymerase with Mg2+-free Buffer(镁离子单加Taq酶)
货号 规格 销售价
MF214-01 500U 98.00
MF214-05 5x500U 398.00
MF214-10 10x500U 798.00
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    产品名称                      单位     货号

    M5 Taq DNA Polymerase with Mg2+-free Buffer    500U    MF214-01

    M5 Taq DNA Polymerase with Mg2+-free Buffer   5x 500U  MF214-05

    M5 Taq DNA Polymerase with Mg2+-free Buffer  10x 500U  MF214-10

     

    储存条件

    长期保存,请置于-20˚C

     

    产品简介

    本产品是从高度耐热菌Thermus aquaticus 中克隆其DNA聚合酶基因,原核表达后经柱层析纯化获得的超纯、高效、耐热DNA聚合酶,SDS-PAGE 显示为一条94kD的蛋白条带。该酶除具有5’-3’DNA 聚合活性外,还具有少量的5’-3’DNA 外切活性,但不具有3’-5’DNA外切活性(校读活性),适用于常规PCR扩增。M5 Taq DNA Polymerase 扩增得到的 PCR 产物含有 3’-A 碱基,可直接用于 TA 克隆 (聚合美TOPO-TA克隆载体货号:MF019或MF020)。

     

    产品组份

    M5 Taq DNA Polymerase (5 U/µl)              100 μl

    10x M5 Taq PCR Buffer (Mg2+-free)            1.0 ml

    25 mM MgCl2                               200 μl

    10x M5 Taq PCR Buffer (Mg2+-free) 成分:100 mM TrisCl (pH 8.3), 500 mM KCl

     

    活性定义

    用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物,在74℃、30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定义为 1 个活性单位(U)。

     

    适用范围

    1. 基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量DNA的检测。
    2. 用于从复杂模板中如基因组等扩增PCR产物,如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析(SNP)等。

     

     

    所需试剂】使用者需准备PCR反应的模板、引物、dNTPs和蒸馏水等。

     

    操作示例

    按下表配制PCR反应体系(冰上操作):

    Template DNA*  

    1 μl

    10× M5 Taq PCR Buffer                        

    5 μl

    25 mM MgCl2

    3 μl**

    10mM dNTPs

    1 µl

     正向引物 (10 μM)                      

    1 µl

     反向引物 (10 μM)                     

    1 µl

     M5 Taq DNA Polymerase(5U/µl)

    0.5-1 µl

     ddH2O补足至

    50 µl

     

    建议的PCR条件

     

    94°C

    2 min. 

    25-35 cycles of:

     

    94°C

    30 sec. 

    55–65°C

    30 sec. 

    72°C

    30sec.-1min./1kb DNA

    72°C

    5 min. 

    保持 4°C forever

     

     

     

     

    <*模板量:10~1000 ng 基因组 DNA,1~30 ng 质粒,或 1~2 μl RT-PCR 反应后的 cDNA。以上举例为常规 PCR 反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩小反应体系

    ** 镁离子的最佳浓度为 1.5~2.0 mM,优化时可以 0.5 mM 梯度递增,最高到 4 mM。>。

     

    电泳结果检测】取2 μl反应液,添加上样缓冲液,电泳观察结果。

     

     

     

    备注

    本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时,本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。