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种子RNA提取,很难吗?

植物代谢过程中产生的多糖多酚,一直是很多植物研究生的梦魇!多糖多酚样本的RNA,提不出来或者降解时常发生。而作为植物的营养储存器官,种子中积累大量多糖多酚、淀粉、脂肪及贮藏蛋白及酮、甙等次生代谢产物。坚硬的种皮,细胞壁也很难被破坏,种子RNA提取相比叶片等其他器官,更是难上加难!

 

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坚硬的种皮,含有大量淀粉等物质,RNA提取困难

进口品牌5000多的试剂盒,很多植物种子提取失败;市面上的各种RNA提取试剂盒对种子并不适用;您需要一款专门为植物种子样本开发的RNA提取试剂盒拯救您的实验!

 

聚合美专注客户需求,针对植物种子样本开发M5 HiPer 植物种子超速RNA提取试剂盒货号:MF737),40min完成种子RNA的提取,得到高质量、高产量RNA,适合RT-PCR等实验,尤其是NGS测序RNA样本的首选!

 

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聚合美目前已成功提取过小麦、玉米、水稻、大豆、向日葵及马铃薯块茎、红薯块根等超过200种植物种子的RNA

 

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只需要把样本使用液氮研磨成粉末状,按照说明书简单操作,能快速去除植物组织中的淀粉、多糖等成分,释放RNA,快速获得高纯度、高完整性的总RNA,可以同时处理大量样品,没有蛋白和基因组DNA的污染。

 

 

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实验实例

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关于多糖多酚多淀粉:

植物多糖理化性质和核酸相似,在提取过程中容易和核酸一起沉淀,很难去除。如果去除不彻底,多糖抑制许多酶的活性,被多糖污染的RNA无法用于很多分子生物学实验。多酚易与核酸和蛋白不可逆结合,使核酸失去活性,在提取过程中容易和蛋白及核酸一起沉淀,形成不溶性化合物,影响核酸的纯化和得率。而淀粉粒包裹RNA一同沉降,造成RNA提取失败。

 

聚合美M5 HiPer Plant RNeasy Complex Mini Kit 货号:MF045),采用独特的裂解液,能够有效把多糖多酚和RNA区分开来。无需氯仿苯酚,30分钟内即可获得高纯度的RNA。可以用于松针、棉花、中草药,各种果实,花卉等样本。

 

 

多糖多酚样本RNA提取注意事项:

 

1.RNA降解的元凶,您一定要知道!

我们发现:冻存样本RNA提取失败的概率远大于新鲜样本!

一些小伙伴直接把样本在Trizol中研磨后放入-20℃保存,但Trizol所代表的裂解液对RNA并没有长久的保护。另外一些小伙伴以为把样本直接用液氮冻住放入-80℃就万事大吉了,其实液氮破坏了细胞结构,细胞内源RNase酶被释放,RNase酶在低温下也是有活性的,会不断的降解RNA,最终导致后续RNA提取失败!

 

聚合美“完璧纯”样本保存液,只需简单处理,让您的RNA完美如初!再也不怕样本降解了!

 

2.RNA样本的结果验证一定要跑电泳验证其结果!

Nanodrop测定吸光值是不准确的(多糖多酚也有吸光值,Nanodrop测定OD值正常,但是反转录和qPCR失败,非常常见)。

 

 

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